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厭氧培養箱操作使用流程及注意事項
?一、操作使用流程?
?準備工作?
將設備放置在溫差小、遠離熱源且平穩的位置,連接氮氣瓶和混合氣瓶(N? 85%、H? 10%、CO? 5%),檢查氣路密封性?。
清潔箱體內部及手套、托盤(pán)等配件,確保無(wú)污染;檢查鈀催化劑是否有效?。
?啟動(dòng)與厭氧環(huán)境形成?
接通電源,開(kāi)啟照明燈和溫控儀,設置目標溫度(通常35–37℃)?。
?氣體置換流程?:
?第一次氮氣置換?:向操作室充入氮氣,使手套鼓起后扎緊袋口,重復三次以降低氧含量?。
?混合氣體置換?:通入混合氣體(N?/H?/CO?),通過(guò)流量計控制流量至10ml/min,重復2–3次確保氧濃度極低?。
啟用鈀催化劑和除氧裝置,1小時(shí)后用美蘭指示劑檢測氧濃度(不變色表示達標)?。
?樣品操作與培養?
通過(guò)緩沖室傳遞樣品:先抽真空(≥66kPa),再充入氮氣或混合氣體,重復2–3次以維持無(wú)氧狀態(tài)?。
穿戴手套操作樣品,避免空氣進(jìn)入;培養期間定期監測溫度、濕度和氧濃度?。
?結束操作?
通過(guò)緩沖室取出樣品,清潔箱內殘留物,關(guān)閉電源及氣源?。
?二、關(guān)鍵注意事項?
?安全與維護?
?氣路檢查?:定期檢測氣瓶、管道是否漏氣,更換氣瓶時(shí)扎緊氣管防止氧氣滲入?。
?催化劑維護?:鈀粒需定期更換或再生,確保催化除氧效率?。
?密封性驗證?:操作前檢查手套、門(mén)縫密封條,抽真空后確認壓力恢復時(shí)間?。
?環(huán)境控制?
箱內物品不宜過(guò)多,避免阻擋風(fēng)道影響溫度均勻性;長(cháng)期使用需每日檢查氧濃度?。
滅菌時(shí)開(kāi)啟紫外線(xiàn)燈,時(shí)間根據實(shí)驗需求設定?。
?設備保養?
停止使用時(shí),設定40℃以上運行2小時(shí),每半小時(shí)開(kāi)門(mén)10分鐘以干燥箱體?。
定期校準溫度、氧濃度傳感器,清潔冷凝水防止傳感器誤差?。
?安全警示?
操作含氫氣的混合氣體時(shí)需遠離明火,防爆防火?。
避免放置易燃、腐蝕性物品,確保設備散熱空間充足?。
以上流程及注意事項整合了設備安裝、環(huán)境控制、樣品操作和長(cháng)期維護的關(guān)鍵步驟,需嚴格遵循以確保厭氧環(huán)境穩定性和實(shí)驗安全性
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